medbr.at.ua - Medbrat - медичний портал, анатомія
close

09:16
Цілі і задачі постановки биопроби на лабораторних тваринах
Цілі і задачі постановки биопроби на лабораторних тваринах
Биопробу на лабораторних тваринах ставлять з метою відтворення клініки захворювання, патогенеза, виявлення екзотоксинов бактерій, визначення типу токсину, отримання чистих культур мікроорганізмів, визначення DLM, LD50, DCL, для випробування нових препаратів, для контролю медичних препаратів, що випускаються на безвредность, реактогенность і иммуногенность.

Найбільш широко в мікробіологічній практиці використовують кроликів, морських свинок, білих мишей, щурів. Лабораторні тварини є донорами, у яких беруть кров для отримання сироваток, плазми, еритроцитів, лейкоцитів, необхідних при постановці багатьох серологических реакцій і для приготування кров'яних живлячих серед.

У залежності від мети дослідження користуються різними методами зараження: внутрикожним, подкожним, внутрішньом'язовим, внутрішньовенним, внутрибрюшинним, пероральним або интраназальним. При виборі способу зараження потрібно враховувати, передусім, механізм поширення збуджувача інфекції (аерогенний, фекальний-оральний, трансмиссивний, контактний і інш.) і тропизм збуджувачів.

Внутрикожний спосіб зараження. При цьому способі застосовують тонкі (№ 18 - 20) гострі голки з невеликим скосом. Шкіру в місці введення матеріалу розтягують I і II пальцями лівої руки, правою рукою вводять голку під дуже гострим кутом, майже торкаючись шкіри. Кінець голки повинен бути видно через епидермис: при введенні матеріалу епидермис підводиться у вигляді чітко обмеженого горбика, шкіра над ним стає прозорою і пористою, внаслідок чого її порівнюють іноді з лимонною корочкой. Матеріал вводять в об'ємі до 0,1 мл звичайно в шкіру спини або живота.

Підшкірний спосіб зараження. Шкіру в місці введення матеріалу беруть у її основи, підводять I і II пальцями лівої руки. Голку шприца вкаливают складки, що знизу утворилася. Проколів шкіру і пройшовши вглиб на декілька міліметрів, голку відхиляють вправо або вліво і потім повільно вводять матеріал, що міститься в шприці. Змінювати напрям голки під шкірою рекомендується для того, щоб введена речовина не виступала через прокол шкіри назовні. Потім складку шкіри відпускають, на місце укола накладають ватяний тампон, змочений спиртом або спиртовим розчином, а голку швидко виймають. Найбільш зручними місцями для подкожного введення матеріалу у кроликів і морських свинок є область спини і бічні поверхні декілька нижче пахвових впадин, у щурів і мишей - область спини, крестца і потилиці. Кількість рідини, що вводиться подкожно, не повинна перевищувати 30 мл - для кроликів, 15 мл - для морських свинок, 10 мл - для щурів і 1 мл для мишей.

Внутрішньом'язовий спосіб зараження. Вибирають дільницю тіла з найбільш розвиненим мишечним шаром. У кроликів і морських свинок, щурів і мишей таким місцем є зовнішня верхня третина стегна задньої лапи. Захоплюють I і II пальцями лівої руки товсту мишечную складку і вводять голку майже під прямим кутом вглиб м'язів. Об'єм рідини, допустимий для внутрішньом'язового введення, складає для кроликів 8 мл, для морських свинок - 5 мл, для щурів 3 мл, для мишей - 0,5 мл.

Внутрибрюшинний спосіб зараження. Помічник тримає тварина вниз головою. У цьому положенні кишечник зміщається у бік діафрагми, що в значній мірі зменшує можливість його пошкодження в момент проколу. У тварин (за винятком мишей) в нижній третині живота, декілька отступя від середньої лінії, роблять скальпелем або загостреними ножицями надсечку шкіри довжиною 2 -3 мм і через неї вводять притуплену голку, тримаючи шприц перпендикулярно до брюшной стінки. Долаючи опір, дуже обережно, рухами, що буравлять голку просувають вглиб. Почуття "провалу", зникнення відчуття опору на шляху говорять про проникнення голки в брюшную порожнину. Після цього голку переводять у вертикальне положення і вводять матеріал, що міститься в шприці в порожнину очеревини. Внутрибрюшинно можна вводити до 30 мл рідини кроликам, до 10 мл морським свинкам, до 5 мл - щурам, до 2 мл - мишам.

Зараження через травний тракт. Найбільш простим і природним є спосіб зараження через харчові продукти. Інфекційний матеріал підмішують до їжі або питва тварини. Однак цей метод в лабораторній практиці знайшов обмежене застосування в зв'язку з трудністю дозування вживаного препарата. Тому для зараження тварин частіше використовують шприц, голка якого має незначний згин і потовщення на кінці у вигляді оливи.

Интраназальное зараження. Тварині прикладають до носа шматочок вати, змоченої ефіром або хлороформом. До зараження приступають після того, як у тварини з'явиться стан легкого наркозу. Заражений матеріал за допомогою шприца вводять в ніс невеликими краплинами на глибину 1-1,5 мм мишам, 2-3 мм щурам, 4 мм кроликам і морським свинкам. Щоб не поранити слизові оболонки, для введення матеріалу беруть абсолютно тупу голку. Фіксація мишей

Миша пускають по столу, притримуючи її I і II пальцями правої руки за кінчик хвоста. Коли, просуваючись в якому - або напрямі, миша натягне хвіст, швидким рухом лівої руки хватають її за складку шкіри в області потилиці, ближче до вух, щоб вона не могла повертати голову. Піднявши мишу над столом, помічник тримає її на вазі однією рукою за хвіст, інший - за складку шкіри на потилиці, декілька розтягуючи в положенні, зручному для експериментатора.

Працювати з мишами можна і без помічника, фіксуючи їх лівою рукою: I і II пальцями лівої руки тварина захоплюють за складку шкіри в області потилиці, а іншими 3 пальцями, притисши їх до зап'ястя, притримують хвіст і шкіру в області крестца. При такому способі фіксування правою вільною рукою можна виробляти різні операції.

Переглядів: 167 | Додав: АДМІН | Теги: Цілі і задачі постановки биопроби н | Рейтинг: 0.0/0